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進(jìn)口elisa試劑盒血清干擾性內(nèi)源性與外源性物質(zhì)的詳解

更新時(shí)間:2019-10-14   點(diǎn)擊次數(shù):2787次
  ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。ELISA試劑盒檢測(cè)中血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本中干擾性物質(zhì)是引起檢測(cè)后結(jié)果偏高或偏低的主要原因,干擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類:
 
  1、外源性物質(zhì)
 
  外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA試劑盒測(cè)定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過(guò)久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。
 
  1)標(biāo)本溶血
 
  由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶為標(biāo)記的ELISA試劑盒測(cè)定中,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,干擾測(cè)定結(jié)果。
 
  2)標(biāo)本受細(xì)菌污染:因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。
 
  2、內(nèi)源性物質(zhì)
 
  常見(jiàn)的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
 
  1)類風(fēng)濕因子:血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子(RF)在ELISA試劑盒檢測(cè)中,可與ELISA試劑盒系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的FC段直接結(jié)合,從而導(dǎo)致檢測(cè)OD值偏高。
 
  2)補(bǔ)體:ELISA試劑盒系統(tǒng)中固相一抗和標(biāo)記二抗過(guò)程中,抗體分子發(fā)生變構(gòu),其FC段的補(bǔ)體C1q分子結(jié)合位點(diǎn)被暴露出來(lái),使C1q可以將二者連接起來(lái),從而造成檢測(cè)OD值偏高。
 
  3)嗜異性抗體:人類血清中含有能與嚙齒類動(dòng)物(如鼠等)Ig(s)結(jié)合的天然嗜異性抗體,可將ELISA試劑盒系統(tǒng)中一抗和二抗連接起來(lái),也能造成檢測(cè)OD值偏高。
 
  此外血清中嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)及血清中脂質(zhì)過(guò)高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過(guò)大等,均對(duì)ELISA試劑盒測(cè)定結(jié)果有干擾作用。
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